Hubungan dengan manusia Sungai Tiber

Rome flood marker, 1598, set into a pillar of the Santo Spirito Hospital near Basilica di San Pietro

Kota Roma dipercayai tertubuh dari tempat Romulus dan Remus diselamatkan dan disusukan seekor serigala betina, Lupa.[5] Titik mula penubuhan kota ini terletak di Ostia, 25 kilometer jauh di tebing sungai tersebut seawal 753 SM. Ia sendirinya merupakan sempadan semula jadi antara puak-puak mendiami kawasan sama: puak Etrusci di tebing selatan, puak Sabini di bahagian timur dan puak Latini di kawasan selatan.

Sungai ini turut menjadi laluan perdagangan utama sejauh 100 kilometer menghulu dari bijirin (sepertimana dicatat abad ke-5 SM tetapi juga batu-bata, balak dan makanan antara Roma dan bandar-bandar sejalan.